经过我们多年生产（chǎn）实践栽培（péi）总结出来的经（jīng）验（yàn）是选用当年表现优异的羊肚菌子实体进行（háng）组织分离以后，再繁（fán）育（yù）出（chū）来的菌种进行栽培（péi）播种，由于转代次数少（shǎo），变异性概率低。再（zài）进行播（bō）种，基本可以保障（zhàng）稳定的出菇率。综（zōng）上所（suǒ）述，掌握（wò）成熟的羊肚菌育（yù）种技术是必要的。以（yǐ）下为大家（jiā）详细的介（jiè）绍羊（yáng）肚菌菌种分（fèn）离及（jí）提纯（chún）复壮技术：
一，选（xuǎn）种（zhǒng）菇  正常（cháng）情况在清晨还没有浇水之前采摘（zhāi）6分（fèn）熟的，没有病害感（gǎn）染，虫（chóng）害咬（yǎo）食的健康羊肚菌作为种菇，还（hái）要看（kàn）菇形与其（qí）母本的（de）外观形态（tài）相似度越高越好。采菇以后不要带土（tǔ）装（zhuāng）入塑（sù）料袋中，根据（jù）不同品种（zhǒng）写好标（biāo）签。
二，种菇处（chù）理  将采到的（de）种菇进行测量，称重，并做好详细记录，测试种菇高，菌（jun1）柄（bǐng）直径，菌帽直径，和菌帽高度。

三，准备工（gōng）作  将制（zhì）备好的（de）PDA 培养基试管，无菌水，储（chǔ）水罐，酒精（jīng）棉，无菌棉摄子，酒精灯，火机，种菇等物品（pǐn）放到无菌操作台上，将杀菌（jun1）灯开好（hǎo），无菌（jun1）风机同时打开，20分钟后就可以进行分离羊（yáng）肚菌菌种的操作了。也可（kě）以（yǐ）在接种箱中进行，把上（shàng）述物品全部（bù）放入（rù）接种箱（xiāng）。接种（zhǒng）箱封（fēng）闭好以后用二氯异氰（qíng）悄（qiāo）酸纳薰蒸30分钟即可开始分离（lí）羊肚菌菌种的工作了。

四，分（fèn）离菌种  1，带好手套，伸入无菌操作（zuò）台的无菌区，或（huò）接种箱内，先用酒精棉球（qiú）对（duì）双手手套（tào）外表进行彻底擦拭消毒，然后用无菌水（shuǐ）对羊肚菌种（zhǒng）菇进行冲洗冲（chōng）洗过程的水倒入（rù）储水罐中，内外都（dōu）要冲洗，冲洗时间为2-3分钟，冲（chōng）洗（xǐ）以后用无菌棉吸干羊（yáng）肚菌表面水分。然后将攝子用酒（jiǔ）精棉消毒处理以后，放在酒精灯火焰顺风（fēng）方向燃烧消（xiāo）毒，再将羊肚菌菌帽与菌柄（bǐng）处掰断，将菇（gū）帽（mào）部分放到一（yī）边，只用菌柄部分（fèn），再拿起一支试管（试管和（hé）菌柄（bǐng）同时用左手（shǒu）拿好，在酒精灯火焰顺风（fēng）处取下（xià）棉塞，棉塞夹在右手中指和无名指（zhǐ）之间，注意（yì）塞（sāi）入试管（guǎn）部分的（de）棉塞向（xiàng）外，不（bú）要与手接触，右手的拇指和食（shí）指拿摄（shè）子夹取菌柄与（yǔ）菌帽断开处的3毫米（mǐ）见方的一块羊肚（dù）菌组织，接入试管斜面培养基前端，塞好棉（mián）塞，放在（zài）旁边，注意（yì）始终保持试管培（péi）养基平（píng）面向下，轻拿轻放。然后再（zài）进行下一（yī）支试管的操作。

五，培养  将分离好（hǎo）的菌种贴好标（biāo）签：标签内容包括日期，品种（zhǒng）名称等信息（xī）。然（rán）后就可以放在20-23度的条件下恒温培（péi）养（yǎng）。注意每（měi）天观察长势，杂菌感染严（yán）重（chóng）的及时挑出。感染轻微的可以保留（liú）进行提纯处理。

六，提纯  在分离的（de）过（guò）程中，难免有杂菌感染，根据羊肚（dù）菌（jun1）菌（jun1）丝生长速度快的特点，即使（shǐ）有羊肚菌菌丝与（yǔ）杂菌共同（tóng）萌发生长（zhǎng），经过三天培养（yǎng），羊（yáng）肚菌菌（jun1）丝（sī）长势会超过杂菌（jun1）一大截，遇到这种情况时就可以进行提（tí）纯处理：
1，准备工（gōng）作：准备提纯的菌种，空PDA试管培养基，酒精灯（dēng），酒精棉，接种钩，火机。消毒处理和上述方（fāng）法一致。
2，提纯流程  戴好手套（tào），用（yòng）酒（jiǔ）精（jīng）棉擦拭消（xiāo）毒，将接种钩擦拭消毒，然后在酒（jiǔ）精灯火焰顺风（fēng）方（fāng）向取下等待提纯菌种试管棉塞，用接种钩在酒精灯火焰处灼烧消（xiāo）毒（dú）处理以后将原来（lái）接入的已经（jīng）感染杂菌的组（zǔ）织（zhī）块部位（wèi）的培养基一同钩出（chū）试管，没有（yǒu）感染杂菌长（zhǎng）有羊肚菌菌丝的培（péi）养基保（bǎo）留1-2厘米即（jí）可。注意接种（zhǒng）钩尽量不要接（jiē）触到杂菌感染的部分。然（rán）后（hòu）仔细（xì）对接种（zhǒng）钩进行彻底消毒处理以（yǐ）后就可以取保留（liú）的羊（yáng）肚（dù）菌纯菌丝（sī）接入新的PDA培养基中，大小以3毫米见方一块为（wéi）宜。然后将提纯（chún）后的试（shì）管（guǎn）贴好标签，做好（hǎo）记录。再放到20-23度进行恒温培养。
七（qī），菌（jun1）种保藏   分（fèn）离，提纯（chún）好的羊肚（dù）菌菌种以后需要及时（shí）进行菌种保藏处理，具（jù）体请参照菌种保（bǎo）藏方（fāng）法 在适（shì）当的季节进行（háng）出菇栽培实验。